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28

2025

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07

紫外可见分光光度计使用全攻略


作为化学实验室常用的分析仪器之一

紫外可见分光光度计你真的会用了吗?

来分享使用心得和避坑指南

 

 

使用步骤详解

 

1.开机准备

▪️先开仪器电源,再开电脑

▪️预热15分钟(重要!)

▪️打开软件

 

2. 参数设置

▪️测量模式:吸光度(Abs)

▪️设置目标波长(比如测DNA用260nm)

▪️扫描范围(全谱扫描时设置)

 

3. 空白校正

➊ 取石英比色皿(紫外区必须用石英!)

➋ 加入3/4体积空白溶剂

➌ 用擦镜纸擦净光面(指纹会影响数据!)

➍ 放入样品池,按"Auto Zero"

 

4.样品测量

▪️ 倒掉空白液,加入待测样品

▪️ 注意液体不要有气泡(轻轻弹击去除)

▪️ 同方向放入样品池(避免误差)

▪️ 点击"Read"获取数据

 

5. 数据处理

▪️ 软件可直接计算浓度

▪️ 建议导出原始数据备份

 

 

 

 注意事项 & 避坑指南

❗ 比色皿使用:

- 石英(190-1100nm)vs 玻璃(340-2500nm)

- 装液量要一致(我们实验室标准3mL)

- 使用前后都要用溶剂润洗

 

❗ 浓度控制:

- 吸光度在0.1-1.0之间

- 超过1.0要稀释后重测

 

❗ 常见错误:

- 忘记预热直接测量 ❌

- 比色皿光面有划痕 ❌

- 不同样品使用不同比色皿 ❌

 

 

 

实用技巧

快速测定DNA浓度:

A260×50×稀释倍数=浓度(μg/mL)

 

判断蛋白污染:

A260/A280≈1.8(纯DNA)

A260/A280≈0.6(纯蛋白)

 

比色皿清洗:

先水洗 → 酒精洗 → 用丙酮冲洗

 

 

 

紫外可见分光光度计